网织红细胞计数实验_实验⽅法

实验原理

由于网织红细胞胞浆中还残存少量核蛋白体和核糖核酸（DNA）可被某些染料（如煌焦油蓝、新美蓝）染成蓝色颗粒和网状物质。故可区别于完全成熟的红细胞，（feticulocyte直径8－9.5cm）

实验材料

血液

试剂/试剂盒

新美蓝溶液

仪器/耗材

显微镜

实验步骤

一、实验试剂：过去用煌焦油蓝，近来国外多用新美蓝溶液，因为后者网状物质着色较深，结果比较恒定，煌焦油蓝染色在不同标本间的差异较大．①、煌焦油蓝溶液：

煌焦油蓝　　0.4g 38g／L柠檬酸钠 20.0ml氯化钠 8.5g／L 加水至100ml②、新美蓝溶液：

新美蓝 1.0g 38g／L柠檬酸钠 20.0ml85g／L NaCl 加水至100ml

二、实验操作：

1、于小试管中加2-3滴新美蓝溶液或煌焦油蓝溶液再加血2-3滴，混合加塞。

2、置37℃，15-20min。

3、摇匀，取小滴推成片薄膜，干燥。

4、选用低倍镜选择红细胞散在而分布均匀部位，然后油镜计数。

5、为方便计数，需把视野缩小，可在目镜内放置一圆形硬纸，中央开一约2mm×3mm小孔。

6．网织红细胞是有网状，细小点状或浅状蓝色物质的红细胞，计数1000个红细胞中含有的网织红细胞数，以10除之，即得网织红细胞的百数．

注意事项

l、网织红细胞必须在活体，染色条件下才能显示，染色与血液的比例以1：l为宜。

2、血膜制备技术很重要，红细胞应均匀散开，如有重叠则影响结果的准确性。一般选择血膜的体尾交界处进行计数。

参考植：成人：0.008-0.02或（25-75）×10⁹／L初生儿：0.020-0.06

实验方法

网织红细胞计数实验