间接凝集抑制试验_实验⽅法

实验原理

将待测样品与己知抗体混合并作用一定时间后，再将其与相应抗原致敏的乳胶颗粒混合，如待测样品中含有相应抗原，便可与加入的抗体结合。当再加入致敏乳胶颗粒后，就没有相应的抗体与乳胶颗粒表面的抗原结合，因而就不出现凝集现象，此为乳胶凝集抑制反应，所以不发生凝集者为阳性，表明待测样品中含有相应抗原；发生凝集者为阴性，提示待测样品中无相应抗原。

本法主要用于检测可溶性抗原，如乳胶妊娠试验，就是先将待测孕妇尿液（含有人绒毛膜促性腺激素，HCG）与已知抗HCG抗体作用，从而抑制了抗HCG抗体与致敏乳胶颗粒表面上的HCG结合，于是乳胶凝集被抑制

实验步骤

1. 取玻片一张置实验台上 , 用特种铅笔将其划分为三格 , 并注明1、2、3。

2. 用滴管吸取盐水一滴加至第 2 格 , 然后取待测孕妇尿一滴加至第 1 格中 , 另吸取阳性孕妇尿一滴加至第 3 格。

3. 于第1、2、3三格中各滴加一滴兔抗人 HCG 免疫血清 , 分别用牙签将反应液充分搅拌混匀 , 静置 3Os 至 1min。

4. 于第 1、2、3 格中各滴加一滴 HCG 致敏的乳胶抗原 , 分别用牙签搅拌混匀 , 静置lOmin 左右观察结果

乳胶妊娠试验

注意事项

1. 所用诊断试剂必须在有效期内使用 , 用前应充分摇匀。

2. 滴管和搅拌反应液的牙签不能共用。

3. 加样不宜过多 , 玻片应平置 , 以防两格反应液溢流相混。

4. 如肉眼观察不够清楚 , 可将玻片置于显微镜下用低倍镜观察。

其他

第 1 格出现均匀一致的细小凝集颗粒者为阴性（非妊娠尿），如仍为均匀乳胶液体不凝者为阳性（妊娠尿）。

实验方法

间接凝集抑制试验