1、从冰箱中取出试剂盒，置室温平衡20分钟。

2、从锡纸袋中取出检测卡，作好标记。

3、用移液管滴加2滴血清到卡下端两个测试孔中。

4、22—25℃下孵育2分钟。2分钟内血清应沿膜扩散至上端的测试孔中。

5、加入3滴酶结合物到下端两个测试孔中，22—25℃下孵育2分钟，酶结合物应沿膜扩散至上端的测试孔中。

6、加入3滴洗液到上端两个测试孔中，等待完全吸收。

7、滴加2滴底物试剂到上端两个测试孔，22—25℃下孵育5分钟，5分钟后立即观察反应结果。

1. 血清样品2—8℃可保存3天，如果不能在此期间测试，-20℃保存，样品不宜反复冻融。

2. 检测过程中做好标记，以防混淆。

阳性结果：上端两孔都出现蓝色。提示肺炎支原体性lgM存在。

阴性结果：质控孔出现蓝色或轻微蓝色，测试孔无色或呈暗灰色，提示不存在肺炎支原体lgM或其浓度在检测下限之下。

无效反应：质控孔不出现蓝色。产生无效反应的可能原因为：试剂或检测卡质量问题，操作不当，样品扩散不好，酶结合物严重污染，血清中含有过多脂质成分等。无污染血清可离心后再次测试 。

该试剂盒与下列因素不发生交叉反应：腺病毒、风湿因子、呼吸道合胞病毒、抗核抗体、流感病毒A型和B型、副流感病毒3型、组织胞浆菌、巨细胞病毒等。