药物半数致死量LD50的测定实验
实验原理
巴比妥类(barbiturate)药物可抑制中枢神经系统,引起镇静、催眠、抗惊厥及麻醉作用,当剂量过大时可使生命中枢麻痹,最终导致死亡。本实验通过学习测定戊巴比妥钠的LD50值,介绍了药物急性毒性的研究方法。
实验步骤
随机将小鼠分为4~5组,每组3~4只。配制3%戊巴比妥钠原液,可进一步稀释为不同浓度药液。小鼠腹腔注射给药,各组给药剂量按照等比数列递减。记录每组动物的死亡率。目的在于找到并确定造成0%与100%动物死亡的剂量范围。
2. 正式实验
(1)先将小鼠雌雄分开,逐一称重。雌、雄小鼠分别按照体重由小到大(或由大到小)排序。然后按照分层随机原则将小鼠分为5~7组,每组10只。
(2)根据预实验中造成0%与100%动物死亡的剂量范围,在其间设计5~7个不同剂量组,使剂量按照等比数列递减。给药后观察并记录动物的死亡时间和数目。连续观察7~14天。按照简化概率法、改进寇氏法、Bliss法(详见参考书目)计算LD50值及其95%可信区间。
(3)计其方法(寇氏法):
注意事项
2. LD50值计算方法很多,其中Bliss法亦称作加权几率单位法或几率单位正规法,是目前新药审批中规定使用的方法。现可通过统计软件计算完成,如中国药理学会数学药理专业委员会编制的药效学统计软件。
3. 若同时测定药物的LD50值及ED50值(半数有效剂量),可计算药物治疗指数TI(therapeutic index),即TI= ED50/LD50。通常来说,药物治疗指数越大,则越安全。
其他
意义:
1、是衡量药物毒性大小的指标,评价药物优劣的重要参数
2、评价药物安全性---治疗指数
3、申报新药过程中必须提供的药理学资料