流式细胞术间接免疫荧光标记的样品制备实验
实验原理
1. 将10×的结合缓冲液用蒸馏水稀释成为1×,冰育。
2. 悬浮细胞在低温环境中,用PBS洗涤细胞2次(800~1000rpm离心,5min)。
3. 弃上清,加入490μl预冷的结合缓冲液重悬细胞(细胞浓度为105~106/ml)。
4. 加入5μl Annexin V-FITC和5μl PI于细胞悬浮液中,轻轻混匀。
5. 将试管置于冰上,避光孵育10分钟。
6. 上FCM检测。
实验步骤
1. 将10×的结合缓冲液用蒸馏水稀释成为1×,冰育。
2. 悬浮细胞在低温环境中,用PBS洗涤细胞2次(800~1000rpm离心,5min)。
3. 弃上清,加入490μl预冷的结合缓冲液重悬细胞(细胞浓度为105~106/ml)。
4. 加入5μl Annexin V-FITC和5μl PI于细胞悬浮液中,轻轻混匀。
5. 将试管置于冰上,避光孵育10分钟。
6. 上FCM检测。