实验方法

流式细胞术细胞凋亡检测样品的制备实验

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本实验方法来源于第四军医大官方网站

流式细胞术间接免疫荧光标记的样品制备实验

实验原理

根据实验方案诱导细胞凋亡,制备单细胞悬液,使用 Annexin V-FITC 细胞凋亡检测试剂盒,通过Annexin V抗体与磷脂丝氨酸(PS)的特异性结合来检测细胞凋亡的情况。

1. 将10×的结合缓冲液用蒸馏水稀释成为1×,冰育。

2. 悬浮细胞在低温环境中,用PBS洗涤细胞2次(800~1000rpm离心,5min)。

3. 弃上清,加入490μl预冷的结合缓冲液重悬细胞(细胞浓度为105~106/ml)。

4. 加入5μl Annexin V-FITC和5μl PI于细胞悬浮液中,轻轻混匀。

5. 将试管置于冰上,避光孵育10分钟。

6. 上FCM检测。

实验步骤

根据实验方案诱导细胞凋亡,制备单细胞悬液,使用 Annexin V-FITC 细胞凋亡检测试剂盒,通过Annexin V抗体与磷脂丝氨酸(PS)的特异性结合来检测细胞凋亡的情况。

1. 将10×的结合缓冲液用蒸馏水稀释成为1×,冰育。

2. 悬浮细胞在低温环境中,用PBS洗涤细胞2次(800~1000rpm离心,5min)。

3. 弃上清,加入490μl预冷的结合缓冲液重悬细胞(细胞浓度为105~106/ml)。

4. 加入5μl Annexin V-FITC和5μl PI于细胞悬浮液中,轻轻混匀。

5. 将试管置于冰上,避光孵育10分钟。

6. 上FCM检测。

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