HPLC-UV法
实验原理
实验步骤
（1）液-液提取净化法
动物肝脏、肾、肌肉、水产品：称取5 g试样，精确至0.01 g。置于50 mL棕色离心瓶中，加入25 mL乙腈和无水硫酸钠，于液体混匀器中快速混匀1min，均质后以3000 r/min离心5min，将乙腈层移入100 mL棕色分液漏斗中。离心后的沉淀物再加入25 mL乙腈摇匀，于3000 r/min离心5 min，合并乙腈提取液。
牛奶：称取5 g试样，精确至0.01g。置于50 mL棕色离心瓶中，加入25 mL乙腈，涡旋混合l min，超声波提取30 s，3000 r/min离心10 min，过滤，待净化。
提取液中加入25 mL乙腈饱和正己烷溶液，振摇5 min，将底层乙腈溶液移入100 mL棕色鸡心瓶中，加入10 mL正丙醇，用旋转蒸发仪于45 ℃水浴中减压蒸发 至近干，氮气流吹干。残留物中加入1.00 mL乙腈-水溶液（1 + 1），超声30 s溶解残渣，将溶解液移入10 mL棕色离心管中，加0.5 mL乙腈饱和正己烷，以3000 r/min离心5 min，弃去正己烷溶液，将底层乙腈水溶液移入棕色样品瓶中，供液相色谱测定。
（2）固相分散微波辅助萃取法
动物肝脏、肾、肌肉、水产品：称取6 g C18填料置于玻璃研钵内，取2.0 g动物组织加至C18填料上用玻璃杵轻轻研磨30 s，使样品与填料均匀混合；装于50 mL聚四氟乙烯试管中，加入25 mL乙腈/水，旋涡振荡1 min放入家用微波炉中微波福照30 s，离心5 min，将乙腈层移入100 mL棕色分液漏斗中。离心后的沉淀物再加入25 mL乙腈摇匀，超声波提取30 s，于3000 r/min 离心5 min ，合并乙腈提取液。
牛奶：取2.0 g牛奶，置于玻璃研钵内，加入6 g硅藻土，另加入6 g C18填料，用玻璃杵轻轻研磨30 s，使样品与填料均匀混合；装于50 mL聚四氟乙烯试管中，加入25 mL乙腈-水溶液（1 + 1），旋涡振荡1 min，放入家用微波炉中微波辐照30 s，离心5 min，将乙腈层移入100 mL棕色分液漏斗中。离心后的沉淀物再加入25 mL乙腈摇匀，超声波提取30 s，于3000 r/min离心5 min，合并乙腈提取液。
提取液中加入25 mL乙腈饱和正己烷溶液，振摇5 min，将底层乙腈溶液移入100 mL棕色鸡心瓶中，加入10 mL正丙醇，用旋转蒸发仪于45 ℃水浴中减压蒸发至近干，用氮气流吹干。残留物中加入1.0 mL乙腈-水溶液（1 + 1），超声30 s溶解残渣，将溶解液移入10 mL棕色离心管中，加0.5 mL乙腈饱和正己烷，以3000 r/min离心5 min，弃去正己烷溶液，将底层乙腈水溶液移入棕色样品瓶中，供液相色谱测定。
2. 仪器参数
色谱柱：Aglient ZORBAX SB-C18，5 um，250 mm × 4.6 mm；
流速：0.8 mL/min；
柱温：30 ℃；
进样量：30 uL；
测定波长：260 nm、275 nm、280 nm；
流动相：乙腈与15%甲醇-0.1%甲酸溶液。
