原代细胞的脂类染色方法苏丹红Ⅲ染色法
实验原理
实验材料
实验步骤
一、配制试剂:
1. 苏丹红Ⅲ染色液:将1g苏丹红Ⅲ溶于加温的70%乙醇溶液中过滤备用;
2. 甲醛钙固定液:将10ml甲醛和1g CaCl2混合加水至100ml;
3. 甘油明胶:将12g明胶加入120ml蒸馏水中水浴加热使其完全溶解,再加入60ml甘油和1g苯酚,充分混匀后即得。于4℃储存备用;
二、染色步骤:
1. 用Hanks液漂洗盖玻片3次;
2. 用甲醛钙固定液固定20min;
3. 用蒸馏水漂洗盖玻片3次;
4. 用70%乙醇将盖玻片冲洗3次;
5. 用苏丹红Ⅲ染色液覆盖盖片样品,染色10—30min;
6. 用70%乙醇漂洗盖片3次;
7. 用甘油明胶封片后观察;
三、结果:
原代细胞含脂类的区域呈橘红色;