实验方法

细胞骨架观察实验

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细胞骨架(微丝和微管)是细胞质中重要的结构之一,近年研究证明CSL 与细胞运动以及细胞转化有密切关系。内容来源:组织培养和分子细胞学技术。(北京出版社)

鬼笔环肽显示微丝蛋白染色法

实验原理

1.  盖片培养细胞(70 %~80 %汇合),PBS洗3 次;

2.  2 %的甲醛/PBS 液(甲醛按37 %)固定3 分钟;

3.  0.5 %的三硝基甲苯/PBS处理3 次,每次10 分钟;

4.  PBS漂洗3 次;

5.  用罗丹明(Rodamine)标记的鬼笔环肽(Phalloidin)(1:10)室温中反应15 分钟;

6.  PBS漂洗3 次;

7.  60 %甘油+荧光防淬剂封片;

8.  荧光显微镜检。

实验材料

细胞

试剂/试剂盒

PBS 三硝基甲苯 甘油

仪器/耗材

显微镜

实验步骤

1.  盖片培养细胞(70 %~80 %汇合),PBS洗3 次;

2.  2 %的甲醛/PBS 液(甲醛按37 %)固定3 分钟;

3.  0.5 %的三硝基甲苯/PBS处理3 次,每次10 分钟;

4.  PBS漂洗3 次;

5.  用罗丹明(Rodamine)标记的鬼笔环肽(Phalloidin)(1:10)室温中反应15 分钟;

6.  PBS漂洗3 次;

7.  60 %甘油+荧光防淬剂封片;

8.  荧光显微镜检。

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