抗生素除菌法
实验原理
各种抗生素性的性质不同,联合应用比单用效果好;一般在已发生微生物污染后,再使用抗生素,常难以根除.预防性应用比污染后使用更好。有时抗生素仅对细菌有抑制作用,而无杀灭效应;反复使用抗生索还能使微生物产生抗药性,且对细胞本身也有一定影响,因此有有主张尽量不用抗生素。当然在一些有价值的细胞,仍需用抗生素挽救,在这种情况下,可采用比常用量大5~10 倍的冲击法,加药后作用24~48 小时,再换入常规培养液中,有时可能奏效。
实验材料
仪器/耗材
实验步骤
1. 抗生素制备
均可用PBS配成250×浓缩液-20 ℃备用;
2. 处理
取受支原体污染的细胞,吸除培养液,加入含BM-1的1640培养液培养3 天后,吸除培养液,再加入含BM-2 的1640培养液培养4 天,如此连续三个轮回;
3. 检测
用33258 荧光染色镜检(每个轮回末应检测一次);
4. 培养
清除支原体后的细胞,在不加上述抗生素的培养液中,再培养传代3~4 次;
5. 镜检
如清除不彻底可再进行处理至纯净为止(一般3 个轮回即能被完全消除)。BM-1 和BM-2 与CIP 联合应用亦可,即先用含BIP培养液培养12 天后,再按上述方法处理。