实验方法

丰富培养基配制实验

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内容来源:精编分子生物学指南第五版。

丰富培养基配制实验

实验原理

配制方法同极限培养基,但高压需25 min (除非特殊说明的),不需稀释。

仪器/耗材

玻璃瓶 烧瓶

实验步骤

1.  在一个2L烧瓶中,将如下配方中的各成分加入水中, 加热搅拌直至其溶解。

(1)H 培养基,每升

10 g胰化蛋白胨

8 g NaCl

(2)λ 肉汤培养基,每升

10 g 胰化蛋白胨

2.5 g NaCl

(3)NZC肉汤培养基,每升

10 g NZ胺A (NZ Amine A)

5 g NaCl

2 g MgCl2 • 6H20

高压30 min

5 ml 20% 酪蛋白水解物(casamino acid)

(4)LB 培养基,每升
 
10 g 胰化蛋白胨

5 g 酵母提取物

5 g NaCl

1 ml 1 mol/L NaOH

(5)超级肉汤培养基,每升

32 g 胰化蛋白胨

20 g 酵母提取物

5 g NaCl

5 ml 1 mol/L NaOH

 
(6)TB (超级肉汤培养基),每升
 
12 g Bacto 胰化蛋白胨

24 g Bacto 酵母提取物

4 ml 甘油

加水至900 ml并高压灭菌,加人100 ml 无菌的0. 17 mol/L KH2PO4 和0. 72 mol/L K2HPO4

(7)胰化蛋白胨肉汤培养基,每升

10 g 胰化蛋白胨

5 g NaCl

(8)2 X TY培养基,每升

15 g 胰化蛋白胨

10 g 酵母提取物

5 g NaCl

(9)TYGPN培养基,每升

20 g 胰化蛋白胨

10 g 酵母提取物

10 ml 80%甘油

5 g Na2HPO4

10 g KNO3
 
2.  倒入玻璃瓶中,拧松盖子,于15 lb/in高压灭菌25 min。

3.  待培养基冷却至50°C以下(在这个温度时,手持瓶子可感觉热但能握得住),再加人其他补充成分和抗生素,玻璃瓶冷却至40°C以下,盖紧盖子。

4.  可于室温无限期保存。 




 
 

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